PCR产物为什么能连入T载体?

PCR产物为什么能连入T载体?

以T-Vector pMD19 (Simple)为例,是一种在两侧的3’端添加了一个“T”的线性化载体。而使用Taq酶(缺乏3’ → 5’外切酶活性)进行PCR反应时在PCR 产物的3’末端添加一个未配对的“A”,可与T载体上的“T”匹配,通过TA克隆完成连接。

注意:高保真聚合酶Pfu产生的PCR产物3’末端为平滑末端,不额外添加“A”。

参考内容:TAKARA关于T-Vector pMD™19的介绍