破骨细胞的诱导培养：1.用提取的单核淋巴细胞计数后按每孔2×104个细胞铺96孔板，每孔加DMEM培养基200μL,孵育5h。2.弃培养液，加带血清的DMEM,200μl/孔，孵育24h。3.（细胞消化：弃培养液，会有贴壁细胞，加0.25%胰蛋白酶40μL,晃动混均,37℃消化3-5min，代细胞将近脱落时，加完全培养液终止消化。反复吹打细胞，1500r/7min。收集细胞沉淀加完全培养基重悬。→对于成骨细胞等可以，对于破骨细胞，一是比较难消化，二是消化后难贴壁。）将每孔分为4个视野，在显微镜下计数。4.弃培养液，加含诱导因子的DMEM200μl/孔（血清20%，GM-CSF 25ng/m，RANKL 30ng/ml），孵育，每三天换一次液。5.到出现破骨细胞时再进行计数。
